RECONSTRUCCIÓN Y TOMOGRAFÍA 3D

Existen tres maneras realizar una tomografía 3d en las muestras que normalmente se observar con un microscopio electrónico, dos son utilizando el propio SEM de forma directa y la tercera es combinándolo de forma secuencial con un tomografo de alta resolución o micro-CT.

Reconstrucción SBF de un volumen 3D en materiales materiales biológicos con la ayuda de un Ultramicrotomo realizando una reconstrucción de cortes seriados o Serial Block Facing (SBF). El ultramicrotomo puede estar dentro o fuera del SEM hablando así de in-situ y ex-situ SBF. La técnica de combinar los cortes seriados por ultramicrotomía con la resolución y capacidades de un microscopio de emisión de campo es una forma rápida y asequible de realizar reconstrucciones 3D en las muestras biológicas con resolución nanométrica

Las muestras de tejido y células son embebidas en resinas y teñidas con metales pesados para ser procesadas por un ultramicrotomo y obtener imágenes a bajos voltajes de aceleración.

La adquisición tomográfica de seccionamiento en serie puede ir acompañada de otras técnicas de imagen analíticas, incluidas EDS, EBSD y CL, para agregar más información sobre el volumen explorado.



La aparición de FIBs de plasma (AmberX) son un gran avance en la reconstrucción 3D ya que permite reconstruir áreas mucho mayores y más representativas de las muestras, de esta manera los FIB de Ga clásicos (Solaris) se recomendarían para reconstrucciones de áreas pequeñas a máxima resolución (5 nm isométricos) y los de plasma para áreas mayores a resoluciones nanométricas. 

Reconstrucción 3D de alta resolución usando un FIB 

Los FIB disponen de una columna de iones con la que se puede ir nano tallando la muestra y una columna de electrones SEM con la ir haciendo imagen de la superficie resultante. Así la reconstrucción 3D de un volumen de muestra se puede lograr mediante cortes en serie utilizando el FIB en combinación con imágenes SEM de alta resolución de cada sección transversal.

Una vez finalizado el procesamiento, el volumen 3D se puede manipular libremente para su visualización, y con un tratamiento adicional, como el umbral o la segmentación, es posible mantener solo ciertas partes de interés y eliminar otras para tener una mejor visualización del objeto.

Tomografía no destructiva por rayos X 

La Micro Tomografía Computarizada (Micro-CT) es un método de análisis por rayos X donde se representa la imagen interna y externa de un objeto en 3D.

Es el mismo método usado en medicina con los escáneres CT, pero a una escala mucho más pequeña y con una resolución mucho más alta, realmente lo que se llega a representar es una imagen microscópica en 3D.

Esta técnica es a diferencia de los FIB donde el material eliminado no se puede restaurar, un método no destructivo.

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Soluciones TESCAN para reconstrucción y tomografía 3D